C18液相色譜柱是常見(jiàn)的一種液相色譜分析柱,其外觀為一根細(xì)長(zhǎng)的柱體,柱內(nèi)填充有具有親水性、疏水性的特殊材料,能夠?qū)悠愤M(jìn)行有效分離。被廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域中,具有分離效果好、再生性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。但在使用過(guò)程中也需要注意一些事項(xiàng),以保證分析效果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
一、原理:
它以載體C18硅膠為基礎(chǔ),表面有著親水作用基團(tuán)和疏水作用基團(tuán),即為有機(jī)硅烷烴,它能夠在相反的極性與氫鍵作用下,從復(fù)雜的混合物中一步步地將各種成分分離出來(lái),之后用進(jìn)樣器送進(jìn)柱中。C18柱堆砌的成品可以很長(zhǎng),為什么這么長(zhǎng)?因?yàn)槠錆?rùn)濕性較差,需要較長(zhǎng)的均相化時(shí)間,柱子越長(zhǎng),分子擴(kuò)散的時(shí)間越長(zhǎng)越有利。
二、性能優(yōu)點(diǎn):
1、分離選擇性好:C18柱中的疏水相互作用可有效分離不同化合物。
2、適用范圍廣:適用于許多有機(jī)、無(wú)機(jī)化合物和生物類化合物的分離。
3、再生性強(qiáng):有適當(dāng)?shù)乃釅A穩(wěn)定性和保持良好性能的方法,同時(shí)具有很好的再生性。
4、使用壽命長(zhǎng):一般可以使用3~6個(gè)月,這對(duì)于長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)的研究有巨大的價(jià)值。
三、應(yīng)用:
C18液相色譜柱廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、環(huán)保、化學(xué)、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域中。在農(nóng)業(yè)中,被用于分離農(nóng)藥與其他化合物,便于在田間操作中的使用。
在生物領(lǐng)域,可被用于肽、蛋白質(zhì)的純化。例如,它可以用于肽的富集分離和金屬蛋白質(zhì)的純化與鑒定。此外,還可以用于生物質(zhì)量分析(MALDI-MS)中的樣品分離和富集。
在化學(xué)領(lǐng)域中,用于有機(jī)物、天然化合物、無(wú)機(jī)物等化學(xué)品的分離、純化和檢測(cè),這對(duì)于化學(xué)發(fā)現(xiàn)和化學(xué)工業(yè)有很大的助益。
四、使用注意事項(xiàng):
1、柱的使用壽命:C18柱的使用壽命一般為3-6個(gè)月,使用過(guò)久會(huì)導(dǎo)致柱子失效,分離效果變差。
2、保持柱子干燥:C18柱屬于親疏作用基團(tuán)的材料,應(yīng)避免水分和濕氣進(jìn)入柱中,以免降低柱子的分離效果。
3、配合良好的移動(dòng)相:C18柱分離的關(guān)鍵在于移動(dòng)相的選擇,如果移動(dòng)相的選擇不當(dāng),則會(huì)影響柱子的分離效果。因此,應(yīng)采用合適的溶劑體系來(lái)保證柱子的分離效果。